人凋亡相關半胱氨酸肽酶4檢測試劑盒即酶聯(lián)**吸附試驗的通用步驟
捕獲抗體、標準品和檢測抗體均為凍干粉，使用前應保存于-20℃,捕獲抗體、標準品和檢測抗體重懸后，在4℃時*長保存2周。如果您已重懸了EDK的各組份，并準備在2周之后使用，請將重懸的組分分裝并凍存于-20℃，*長可保存6個月。
人凋亡相關半胱氨酸肽酶4ELISA試劑盒, 英文名稱：Human apoptosis-related cysteine peptidase 4 (Casp4) ELISA kit
貨 期：現(xiàn)貨,主要用途：科研檢測,用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。
與EDK的其它三個組分不同，Avidin-HRP為即用型
目的是避免反復凍融或長期4℃保存對該組分的功能損害。收到Avidin-HRP后，立即將其分裝為6ul/管，共10管，凍存于-20℃，*長可保存2年
人凋亡相關半胱氨酸肽酶4檢測試劑盒第1階段：
捕獲抗體包板,將捕獲抗體稍作離心，使抗體集中于管底,用無菌水將捕獲抗體重懸至說明書上要求的濃度，靜置10分鐘以使抗體完全溶解,重懸的抗體以*高速度離心3分鐘,用1xPBS稀釋捕獲抗體至說明書上要求的濃度,輕輕顛倒或振蕩混勻，一定不要產(chǎn)生氣泡。
立即在每個ELISA板孔中加入100uL捕獲抗體,將封板膜用力壓蓋在ELISA板上，注意不要使抗體滴濺在封板膜上,25 ℃孵育過夜，或者37℃孵育2-4個小時,洗板時需將液體倒掉，并在干凈的吸水紙上拍干,每孔加入300ul 洗液，然后再將液體吸除,該步驟再重復3次，總共洗滌4次,*后一次洗滌后，將板倒置以去除液體，并在干凈的吸水紙上拍干,ELISA板還有其它幾種洗滌方法。無論使用哪種方法，請在整個ELISA實驗過程中保持一致。
人凋亡相關半胱氨酸肽酶4檢測試劑盒**階段：封閉非特異性結合
牛血清白蛋白作為封閉試劑，可封閉塑料孔內任何未結合蛋白的位點,每孔中加入300ul封閉液,封板，并在25 ℃孵育至少1小時。
第3階段：抗原的特異性結合,在上一孵育過程結束前,將標準品稍作離心,并用無菌水重懸至要求的濃度,靜置至少10分鐘，以使標準品完全溶解,重懸結束后，取出板并洗滌4次,重懸的標準品以*高速度離心3分鐘,稀釋到所需濃度，輕輕顛倒或振蕩混勻,標準曲線在ELISA板上的區(qū)域專用于檢測已知濃度的蛋白標準品,如果使用多道移液器，除**列外的所有標準曲線孔中均加入100ul稀釋液,然后，人凋亡相關半胱氨酸肽酶4檢測試劑盒在標準曲線孔的**列中加入200ul標準品溶液,依次倍比稀釋，標準品至少有6個濃度,每個標準曲線孔中液體的終體積應為100ul,標準品至少有6個濃度，每個濃度為3個復孔，再設6個空白孔，其中僅含稀釋液,空白孔是必須的，它們將用來評價試劑盒檢測樣本的效能,然后，在剩余孔中加入待測樣本，每個樣本設3個復孔,樣本中若待檢抗原的濃度過高，要得到*佳結果可能需對樣本進行稀釋,封板，25 ℃孵育2小時。
人凋亡相關半胱氨酸肽酶4檢測試劑盒第4階段：加入生物素標記的檢測抗體以形成夾心,孵育結束前，稍離心檢測抗體，并用無菌水重懸，靜置10分鐘,孵育結束后，取出板，洗滌4次,*高速度離心3分鐘。
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